Investigações

Primeiras investigações a serem solicitadas

hemoglobina (Hb)

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A Hb estará normal no portador silencioso de talassemia alfa e pode estar ligeiramente diminuída no traço de talassemia.

A Hb é variável na doença da Hb H: aproximadamente 80 a 120 g/L (8-12 g/dL) na doença delecional e 60 a 110 g/L (6-11 g/dL) na doença não delecional.[43][53]

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normal a baixa

volume corpuscular médio (VCM)

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O VCM se correlaciona com pioras fenotípicas e genotípicas da doença. Os pacientes com talassemia alfa de portador silencioso apresentam um VCM de normal a ligeiramente baixo, ao passo que os pacientes com traço de talassemia alfa delecional geralmente apresentam um VCM de <78 fentolitros.[48]​​ Os pacientes com doença da Hb H delecional apresentarão um VCM pouco acima de 60.[43] Pacientes com HB H/Constant Spring apresentarão VCM de normal a levemente baixo e os que forem homozigóticos para “Hb Constant Spring” (alongamento da globina alfa) geralmente terão VCM normal.

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baixa

hemoglobina corpuscular média (HCM)

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A HCM será de normal a baixa (24-29 picogramas/célula) nos pacientes com 1 gene afetado de talassemia alfa de portador silencioso, e será baixa (<27 picogramas/célula) em pacientes com >1 deleção da globulina alfa ou nos que apresentam mutações não delecionais. A HCM média será aproximadamente de 20 picogramas/célula na doença da Hb H.[43]

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baixa

contagem de eritrócitos

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Deve ser realizado em todos os pacientes.

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elevada; variável, de acordo com a intensidade

esfregaço de sangue periférico

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Microcitose, hipocromia, aumento da policromasia, células em alvo e anisopoiquilocitose; podem ser observados fragmentos de eritrócitos; o pontilhado basofílico pode ser proeminente na Hb H/Constant Spring e na “Hb Constant Spring” (alongamento da globina alfa) homozigótica.[6][48]

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formato e tamanho anormais das células

percentual de reticulócitos

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Elevada (5% a 10%), e pode aumentar ainda mais durante as infecções agudas ou crises hemolíticas.[48]

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aumentada

ferro sérico

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normal ou elevado

ferritina sérica

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A terapia quelante de ferro pode ser considerada, quando a ferritina for >1797.6 picomoles/L (800 nanogramas/mL).[50]

Os níveis de ferritina sérica podem subestimar a concentração hepática de ferro.[52]

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normal ou elevado

Investigações a serem consideradas

coloração de azul de cresil brilhante dos eritrócitos

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Normalmente, são observados numerosos corpos de inclusão na doença da Hb H.[16] Alguns especialistas consideram esse teste mais confiável que a eletroforese da Hb para o diagnóstico da doença da Hb H.

Pode estar reduzida ou ausente na presença de talassemia beta heterozigótica, como Hb S, Hb C, Hb E ou talassemia beta.​​[43][54]​​

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demonstra inclusões de Hb H nos eritrócitos periféricos

eletroforese de Hb

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Hb H e Hb Bart podem ser detectadas como hemoglobinas de rápida evolução. O teste não detectará um portador silencioso de talassemia alfa ou um traço de talassemia alfa fora do período neonatal (Hb Barts), e não diferenciará a forma delecional da não delecional da Hb H (exceto a “Hb Constant Spring” (alongamento da globina alfa)). Os pacientes com doença da Hb H e beta-hemoglobinopatias heterozigóticas concomitantes, como Hb S, Hb C, Hb E ou talassemia beta apresentam Hb H baixa ou ausente, o que pode confundir o diagnóstico da doença da Hb H.

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presença de Hb H, Hb Bart e hemoglobinopatias concomitantes (Hb E, Hb S, Hb C, Hb D)

fracionamento da Hb por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC)

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O fracionamento de Hb por HPLC proporciona separação rápida e estimativa precisa das variantes de hemoglobina.

O teste não detectará um portador silencioso de talassemia alfa ou um traço de talassemia alfa fora do período neonatal (Hb Barts), e não diferenciará a forma delecional da não delecional da Hb H (exceto a “Hb Constant Spring” (alongamento da globina alfa)). Os pacientes com doença da Hb H e beta-hemoglobinopatias heterozigóticas concomitantes, como Hb S, Hb C, Hb E ou talassemia beta apresentam Hb H baixa ou ausente, o que pode confundir o diagnóstico da doença da Hb H.

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presença de Hb H, Hb Bart e hemoglobinopatias concomitantes (Hb E, Hb S, Hb C, Hb D)

reação em cadeia da polimerase (gap-PCR)

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Sete das deleções de talassemia alfa mais comuns (-alfa (3.7), -alfa (4.2), --(FIL), --(THAI), --(MED), -(alfa) (20.5), --(SEA)) podem ser diagnosticadas por gap-PCR.[48]​​

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detecta deleções específicas

amplificação de múltiplas sondas dependentes de ligação

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Usada para detectar deleções e duplicações no agrupamento de genes da globina alfa que causam talassemia alfa.[48]

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detecta alelos de deleção

sequenciamento direto/dot-blot reverso

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Usado para detectar mutações de talassemia alfa não delecionais.[48][49]

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detecta mutações de talassemia alfa não delecionais

ressonância nuclear magnética (RNM) (hepática ou cardíaca)

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A sobrecarga de ferro hepático pode ser avaliada por RNM R2 ou R2*.[51]

A RNM é o padrão-ouro para a medição da concentração hepática de ferro.​[16]

A carga cardíaca de ferro é avaliada por RNM cardíaca em T2*.[48] A carga de ferro cardíaca é incomum em pacientes não submetidos a transfusão.

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o ferro hepático ou cardíaco em pacientes com sobrecarga de ferro é demonstrado pela diferença na intensidade de sinal órgão-músculo

dispositivos supercondutores de interferência quântica (SQUID)

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Se o estado do ferro estiver significativamente elevado segundo evidenciado por um nível de ferritina sérica >1797.6 picomoles/L (>800 nanogramas/mL), a sobrecarga de ferro no fígado pode ser avaliada por dispositivos supercondutores de interferência quântica (SQUID).[50][51]

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ferro hepático na sobrecarga de ferro

biópsia hepática

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Se o estado do ferro estiver significativamente elevado segundo evidenciado por um nível de ferritina sérica >1797.6 picomoles/L (>800 nanogramas/mL), a sobrecarga de ferro no fígado pode ser avaliada por biópsia hepática.[50][51]

A ressonância nuclear magnética é preferida em relação à biópsia hepática para avaliação da sobrecarga de ferro, sempre que possível, pois tem melhor precisão e menos riscos de procedimento. A biópsia hepática pode ser usada quando uma avaliação histológica for necessária.[21]

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ferro hepático ≥5 mg/grama de peso seco na biópsia hepática indica a necessidade de terapia quelante de ferro

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